GF{3}}1 LR3(Long R3 인슐린-유사 성장 인자-1의 약칭)은 일반적으로 LR3 또는 Long R3으로 알려져 있으며 내인성 IGF-1의 변형 버전입니다. 인간 IGF-1에는 원래 70개의 펩타이드(7.6kDa)가 있습니다. N 말단에 13개의 아미노산(MFPAMPLSSLFVN…)이 단단하게 부착되어 있고 세 번째 글루타메이트(Glu)가 Arg로 대체되어 83개 펩타이드, 9117.5 Da, CAS 946870-92-4가 생성되었습니다.
기본 IGF-1은 6개의 IGFBP(결합 단백질)에 의해 즉시 결합되며, 유리 상태에서는 1% 미만이고 혈장 반감기는 15분에 불과하므로 장시간 작용하는 신호 분석을 수행하기가 매우 어렵습니다.- LR3에 대한 이러한 변형은 IGFBP에 대한 친화성을 약 1000배까지 대폭 감소시켜 유리 펩타이드의 비율을 최대화하고 반감기를 20~30시간으로 연장하는 동시에 수용체(IGF-1R)에 대한 친화력을 원래와 동일하게 유지하여 본질적으로 "비결합 IGF-1"이 되게 했습니다.
IGF-1R(티로신 키나제) 결합 → PI3K/Akt/mTOR 및 MAPK/ERK의 두 가지 경로를 유발합니다. 이는 리보솜 S6K 및 4E-BP1 인산화, 완전한 단백질 번역 및 FoxO 억제로 이어져 단백질 분해 및 합성을 초래합니다. 이는 근아세포/C2C12, 연골세포, CHO 세포 및 MSC의 증식과 분화를 촉진합니다.
핵심 연구 가치("한 번의 주사로 근육 성장"으로 오해하지 마세요):
장시간 작용하는-IGF-1R 프로브: 혈청/IGFBP 함유 시스템에서 안정적인 수용체 점유를 가지며 신호 지속 시간, 수용체 하향 조절 및 mTOR 동역학 측면에서 원래 IGF-1보다 훨씬 깨끗합니다.
혈청-무함유/저{1}}혈청 배양 골드 파트너: Repligen의 LONG R3 IGF-I는 산업용-등급 보충제로서 세포사멸을 억제하고 CHO/MSC 밀도를 높여 인슐린보다 안정성이 뛰어나고 비용이 저렴합니다.
Approximately 3 times the in vitro potency of the original IGF-1, requiring less dosage; however, high concentrations (>200ng/mL)은 실제로 수용체 세포내이입을 하향조절하고 혈소판 증식을 촉진할 수 있습니다. 농도가 높을수록 항상 좋은 것은 아닙니다.
주의 사항: 이것은 임상 약물이 아닙니다. 이는 FDA의 승인을 받지 않았으며 WADA는 이를 펩타이드의 회색 영역으로 분류합니다. 피트니스 커뮤니티에서 사용되는 "50-100 ug 피하 절제" 요법은 연구 프로토콜이 아닌 커뮤니티 복용량입니다. 더욱이, IGF-1R 자체는 종양 증식과 연관되어 있으며 장기간의 오용은 상당한 이론적 위험을 수반합니다.
보관 (시약 동결건조 분말, 9 kDa 단백질은 작은 펩타이드가 아님)
재구성되지 않은 동결건조 분말: -20도에서 밀봉하여 빛으로부터 보호하고 건조제와 함께 1~3년 동안 보관합니다. -80도에서 보관하는 것이 가장 안정적입니다. 4도에서 장기간 보관하지 마시고, 실온에 보관하지 마세요.
재구성된 원액: 대부분의 브랜드에서는 멸균 0.1% 아세트산(pH 3.5~4.5)(중성수로 직접 용해하면 응집이 발생함!), 농도 0.1~2mg/mL로 초기 재구성을 권장합니다. 유통기한은 2~8도에서 2~7일입니다. 장기간 보관하려면{10}}로딩 미디어(0.1% BSA / 5% HSA / 5% 트레할로스 / 10% FBS)로 분취해야 합니다. -80도에서 1회 제공량은 3~12개월 동안 지속될 수 있습니다.
작업 용액: PBS 또는 0.1% BSA가 포함된 완전 배양 배지로 희석합니다. 4도 세포 배양실에 잠시 보관합니다. 반복되는 동결-해동 주기를 피하세요.
지침:
개봉 전 8000~12000g의 온도로 30초 동안 중앙에 두세요. 9 kDa 단백질 동결건조의 경우 병을 벽에 부착하고 뚜껑을 닫습니다. 원심분리 없이 물을 직접 추가하지 마십시오. 병 바닥에 있는 "보이지 않는 가루"는 돈입니다.
초기 용해의 경우 0.1% 아세트산을 사용하여 소용돌이를 피하면서 세포벽을 따라 천천히 휘젓습니다. 각 소용돌이는 형태를 절반으로 왜곡합니다. 투명하고 무색이 될 때까지 튜브를 회전/반전하여 천천히 혼합합니다. 응집된 LR3 수용체는 결합 친화도가 0이므로 흐릿하거나 응집성인 용액을 폐기하십시오.
농도가 낮으면 튜브 벽에 과도한 흡착이 발생합니다. 작업 농도가 1~100ng/mL인 경우 0.1% BSA를 캐리어 또는 저-흡착 튜브로 사용하지 마십시오. 웰에 추가되는 실제 양은 공칭 농도의 30~50%에 불과하므로 세포 내 부피 방출(CV)이 발생합니다.
pH 민감도: 아세트산 원액을 세포에 직접 첨가하지 마십시오(pH 충격은 세포를 죽입니다). 배양 시스템에 추가하기 전에 BSA가 포함된 중성 완충액에 최소 1:100으로 미리 희석하세요.
CoA 모니터링: HPLC 98% 이상, MS 확인 9117.5 Da, 내독소<0.01–1 EU/μg (stricter requirements for cell therapy-grade MSCs); oxidized Met or its truncated form are latent antagonists. RUO label: The label reads "Research Use Only, not for human use," indicating it's not a legally approved drug for human injection; it's for internal use within the IACUC system. Don't mistake peptide suppliers for pharmacies.
증식 실험의 경우 빈 동종 혈청 대조군 + 원래 IGF-1 등몰 대조군 + IGF-1R 억제제(피크로포도필린/OSI-906)의 세 가지 대조군이 필수적입니다. 그렇지 않으면 LR3가 활성 성분인지 또는 혈청의 다른 요인이 기여하는지 여부가 불분명합니다.
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